单克隆抗体（mAb）是传染性疾病或癌症治疗方法中使用最广泛的药物平台之一，因为它们选择性地靶向病原体，传染性细胞，癌细胞甚至免疫细胞。以这种方式，它们以比其他治疗方式更少的副作用来介导靶分子和细胞的消除。特别是，癌症治疗性单克隆抗体可以识别靶细胞上的细胞表面蛋白，然后通过多种机制杀死靶细胞，这些机制取决于与效应Fcγ受体相互作用的可结晶片段（Fc）结构域，包括抗体依赖性细胞介导的细胞毒性和抗体依赖性细胞介导的吞噬作用。通过加强（例如针对靶向治疗）或禁用（例如，用于免疫检查点封锁疗法）的效应子功能，并根据需要延长抗体的血清半衰期。在本报告中，我们回顾了Fc工程技术以提高治疗功效的努力，并提出了可以满足未满足的医学需求的未来抗体工程技术指导。

自2013年以来，美国食品药品监督管理局（FDA）和欧盟的欧洲药品管理局（European Medicines Agency）已批准了31种新的单克隆抗体（mAb），到2017年底，临床上总共使用了57种单克隆抗体1。几份财务报告显示，到2017年12月，抗体市场的销售额已超过980亿美元，年增长率为18.3％，预计到2022年将达到137-2000亿美元1。抗体市场由七家公司主导，在由罗氏集团成员Genentech领导的22家活跃公司中，抗体市场占总市场销售额的87％，其中11种获批抗体分子的市场份额为31％。在疾病适应症方面，截至2017年12月，已批准将57种单克隆抗体中的15种用于癌症治疗，将其作为第一大疾病靶标，并将12种单克隆抗体用于血液学。

在IgG，IgA，IgM，IgD和IgE的免疫球蛋白（Igs）的五种同种型中，IgG占大多数，占人血清总Igs的60％。所有FDA批准的治疗性Ig均属于IgG 2类。内源性IgG分子由两个相同的片段抗原结合（Fab）域和一个可结晶的片段（Fc）域组成，从而使其具有多价和多功能性。两个Fab片段各自由轻链的异二聚体和重链的N末端部分组成，而两个重链的C末端一半二聚化以形成IgG抗体的Fc片段。Fab片段的N端结构域是可变结构域（V L和V H）负责抗原识别，而重链的C末端部分则组成负责体液和细胞效应子功能的Fc片段。两个Fab和Fc通过铰链区连接，这有利于三个部分的空间排列以结合抗原和效应子配体。截至2017年12月，在诊所中可用的单克隆抗体中，有53种可以识别一个表位的天然全长mAb 1。

抗体Fc结构域负责抗体中的功能，而Fab结构域负责靶向。因此，Fc工程代表抗体的工程功能，其是效应子功能，例如抗体依赖性细胞毒性（ADCC）和抗体依赖性细胞吞噬作用（ADCP），并控制血清半衰期。在本文中，我们讨论（i）Fc受体，例如Fcγ受体（FcγRs）和新生儿Fc受体（FcRn）；（ii）Fc工程调节与FcγR和FcRn的结合能力; （iii）其他Fc工程改造工作，例如创建单价或双特异性以提高治疗效果。

Fcγ受体IIIa

识别IgG分子Fc结构域的受体家族称为FcγRs家族。这些受体在免疫效应细胞的表面表达，并通过IgG Fc结构域交联后，诱导下游细胞过程，从而影响先天和适应性免疫。在整个哺乳动物物种3中高度同源的FcγR中，就其对ADCC活性的贡献而言，FcγRIIIa是关键的表面受体（图1a）。通常，在自然杀伤（NK）细胞，巨噬细胞，单核细胞，肥大细胞，嗜酸性粒细胞和树突状细胞的表面发现FcγRIIIa。然而，它是唯一的FcγR表达NK细胞4，5。FcγRIIIa是一种跨膜受体，包含两个胞外域和一个胞质尾巴，对IgG具有中等亲和力（K D =  2×10 -7 M）6。在FcγRIIIa中，基于免疫受体酪氨酸的激活基序（ITAM）序列存在于相关的γ链或ζ链的细胞内区域。该受体的功能取决于单核细胞和巨噬细胞上的γ链或NK细胞上的γ链或ζ链。人类表达两种FcγRIIIa同种异型，它们在158位的单个氨基酸上有所不同。残基可以是缬氨酸（V）或苯丙氨酸（F），因此在158位带有V的同工型对IgG1的Fc结构域具有高亲和力，而在158位带有F的同种型具有低亲和力。此FcγRIIIa的多态性已被证明有助于IgG1的治疗性抗体的临床反应7，8，9，10。通过免疫复合物（IC）的结果，在比FcγRIIIa的-F158的体外细胞毒性效力更强的高亲和力的FcγRIIIa-V158的接合11。关于同种异型人口，FcγRIIIa的-V158纯合子表示只有10-20％的人口全世界的，而FcγRIIIa的-F158纯合子构成40-50％12，13。有趣的是，FcγRIIIa的-V158相关因素与改善的临床结果在治疗淋巴瘤患者的利妥昔单抗高亲和力同种异型的表达7，10。

仅表达FcγRIIIa的人类自然杀伤细胞通过FcγRIIIa（a）激活抗体依赖性细胞毒性。巨噬细胞是针对抗体依赖性细胞吞噬作用的主要促成淋巴细胞之一，已知它是由FcγRIIa细胞内信号传导触发的（b）。

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与到FcγRIIIa的亲和力提高的Fc工程化抗体表现出相对于天然Fc-更高的治疗功效，因为它们能够引发和更有效地激活NK细胞的14，15。然而，几项研究表明，尽管NK细胞或嗜中性白细胞的耗竭并没有显着降低肿瘤抑制活性，但是巨噬细胞的耗竭废除了抗CD20 16，抗CD30 17或抗CD40抗体18在小鼠模型中的治疗功效。这些结果突出了ADCP活性在抗癌治疗功效中的重要性，因为巨噬细胞是白细胞对肿瘤吞噬活性的主要贡献来源之一（图1b）19。ADCP活性已知由FcγRIIa的细胞内信号传导（图来触发图1b） 20，21，22，这已被证明通过糖工程化抗体表现出朝向的FcγRIIa增强的亲和力，导致增加的ADCP活性 21，23。然而，不影响FcγRIIa结合 24但改善ADCP 20的其他人Fc糖基工程抗体的存在也表明FcγRIIIa有助于吞噬活性 25下游信号传导的可能性。

Fcγ受体II：FcγRIIa和FcγRIIb

FcγRII包含具有两个免疫球蛋白样结构域和胞质结构域的细胞外区域的单链多肽α链。在人类中，FcγRII进一步分为FcγRIIa和FcγRIIb。激活的FcγRIIa（K D  = 2×10 -7 M）在α链的细胞内区域包含一个ITAM基序，而抑制性FcγRIIb（K D  =  8×10 -6 M）包含一个基于酪氨酸的免疫受体抑制基序在同一地区26。FcγRIIa启动内吞作用，吞噬作用，ADCC和炎性细胞因子释放。相反，FcγRIIb转导抑制信号，从而下调由激活受体触发的免疫功能。FcγRIIa在位置131的一个氨基酸处具有两个同种异型。该残基可以是组氨酸（H）或精氨酸（R）；H的同工型是一个高亲和力的受体，而R的同工型是一个低亲和力的受体。尽管对FcγRIIa的高结构同源性和蛋白质的序列同一性（96％）与FcγRIIb的27，有许多正在进行的努力以创建与FcγRIIa的改善的亲和力以增加抗体的治疗潜力工程化抗体的28，29，30。

多项研究已经建立了Fc：FcγRs亲和力和选择性与IC参与的免疫效应细胞的细胞毒性功能之间的相关性。例如，已显示出与抑制性FcγRIIb相比，与激活FcγRs的结合增加很重要，因为它增强了曲妥珠单抗或利妥昔单抗31的功效。在其他研究中，在临床上各种抗体的功效已经显示出与FcγRIIIa的等位基因（高亲和力的FcγRIIIa-V158和低亲和性FcγRIIIa的-F158等位基因）关联7，10，11。此外，通过糖工程32或Fc结构域中的氨基酸取代，随着对FcγR 亲和力的提高，体外细胞毒性也随之增加33，34，35，36。尤其是，已显示出对FcγRIIa-R131同工型具有高亲和力且对FcγRIIa的选择性也比FcγRIIb高的Fc变体介导了改善的ADCP活性 30。这些结果表明，对活化FcγRs具有增加的结合亲和力但对抑制性FcγRIIb没有增加的亲和力的抗体引发更强的ADCP，并且可能代表了更有效的癌症治疗方法。

人IgG再循环受体：新生儿Fc受体（FcRn）

IgG是最丰富的抗体同种型，主要是因为其7-23天的超长半衰期。IgG的胞内运输受体的发现和表征是由Brambell及其同事于1966年首次报道的37。该受体被称为新生儿Fc受体分子（FcRn），是由MHC-I类重链和β2-微球蛋白轻链组成的非共价异二聚体。在ER的细胞表面和细胞内存在FcRn，它在不同的结合位点与IgG和白蛋白结合。38，39 Simister和同事首次描述的FcRn为IgG的新生大鼠的肠上皮细胞内的转运，使被动免疫的从母转移到她的后代40，41。虽然啮齿类的FcRn仅哺乳期间在肠上皮细胞中上调，人FcRn在整个生命中几乎所有其他细胞类型中表达，包括内皮细胞 42，43，44 ; 肾足细胞 45; 乳腺上皮细胞 46 ; 肺上皮细胞 47 ; 肝细胞 48 ; 造血细胞，例如单核细胞，巨噬细胞，树突状细胞 49和B细胞 50。

缺乏FcRn或β2-微球蛋白的小鼠血清IgG水平严重降低，因为这些抗体的分解代谢速率增加了。在这些小鼠中，IgG的具有约为1.4天的循环半衰期，而野生型小鼠具有9天的循环半衰期38，51，52。在人类从家族hypercatabolic低蛋白血症患者，在无功能的蛋白质和表达的β2微球蛋白基因导致突变五倍健康个体增加相对于IgG抗体的分解代谢53，54。骨髓嵌合小鼠研究表明，嵌合型Fcgrt-/-骨髓和Fcgrt-/-嵌合的野生型小鼠与野生型骨髓嵌合的小鼠相对于野生型小鼠具有约50％的血清IgG水平55。

FcRn的仅结合到其配体在酸性pH（≤6.5），但是不在中性pH（≥7.0）56，57，58。在生理pH下，与FcRn相互作用的IgG Fc域的组氨酸残基去质子化，从而使配体解离。相反，在更酸性的pH下，质子化的组氨酸残基稳定了IgG：FcRn复合物59。因此，FcRn的严格的pH依赖性配体结合特性似乎已在溶酶体系统中进化为人类中IgG转运和药理学参数（包括稳定性，生物分布和免疫原性）的介质。

抗体的效应器功能，无论它们是由我们自己的免疫系统产生的或治疗性地施用，依靠它们的Fc结构域的与FcγR的和补体成分，如C1的相互作用，以明确病原体或破坏肿瘤细胞60，61，62。抗体的效应子功能是：通过FcγR的招募（ⅰ）ADCC和ADCP 63和（ii）通过补体C1q的募集补体依赖性细胞毒性（CDC）。已知的人FcγR是FcγRI（CD64），FcγRIIa（CD32a），FcγRIIb（CD32b），FcγRIIc（CD32c），FcγRIIIa（CD16a）和FcγRIIIb（CD16b），这些受体在各种免疫表面上以不同水平表达。细胞。63的单克隆抗体的结果从所述活化FcγR的相对于FcγRIIb的抑制它们的Fc结构域之间改善的亲和力的细胞毒性潜力31，64。

NK细胞是众所周知的细胞毒性淋巴细胞，可杀死肿瘤细胞并构成先天免疫系统的主要组成部分。临床上，NK细胞被认为是曲妥珠单抗在乳腺癌患者中抗肿瘤活性的重要介质。有反应性肿瘤的患者倾向于增加与肿瘤相关的NK细胞数量65。IC被NK细胞上的FcγRIIIa识别，从而激活细胞毒性过程和有效的ADCC 66。仅表达FcγRIIIa的人NK细胞通过FcγRIIIa激活ADCC（图1a）。一些癌症治疗抗体的功效已经与广泛FcγRIIIa的多态性：改善临床结果在患者中观察到表达高亲和力同种型V158而不是低亲和力F158同种型7，10，11。

优化抗体和FcγR之间的相互作用已成为一种有前景的方法，可增强治疗性抗体的活性，以治疗癌症和自身免疫性疾病67。因此，近年来对具有改善的FcγRs亲和力的工程IgG进行了广泛的研究。Xencor（美国加利福尼亚州）的研究人员充分利用了基于结构的计算设计算法，可对临床上可应用的抗体的多种治疗效应子功能进行工程设计。他们分离了一系列由增强的结合亲和力介导的具有改善的效应子功能的Fc突变体，包括与FcγRIIb相比，对ADCC 68的 FcγRIIIa结合增加，对ADCP 28的 FcγRIIa的结合增加。。值得注意的是，相对于野生型IgG，S239D / I332E / A330L（EU编号）IgG突变体显示FcγRIIIa结合亲和力增加> 300倍。该抗体还显示出与FcγRIIIa-F158的结合增加了58倍。但是，该抗体也以更高的亲和力与抑制性受体FcγRIIb结合68。例如，由MacroGenics开发的margetuximab适应了与transtuzumab相同的Fab靶标（Her2），但经过Fc工程改造，通过相对于抑制性Fcγ受体，FcγRIIb和与之相比，通过提高相对于激活Fcγ受体，FcγRIIIa的相对亲和力来最大化免疫效应子功能。最近发现的患者相对于曲妥珠单抗在3期临床试验在536名乳腺癌患者24％的风险降低69。其他显著努力已经涉及与FcγRIIIa的改善的亲和力和增强的效应子功能的抗体的工程由氨基酸突变36，70，71，72，73，74或聚糖修饰75，76，77，78，79，80，81。Hatori和同事还设计了一种抗体Fc变异体（P238D / L328E），该变异体显示出与FcγRIIa-R131和FcγRIIa-H131相比，选择性地增强了FcγRIIb的结合82。最近，一些改造的变体已经显示在临床前试验和许正在进入临床试验83，84，85。这些报道表明对FcγR具有改善的亲和力的工程FCS的临床意义。

尽管具有增强的Fcs破坏肿瘤功能的抗体对于靶向肿瘤是理想的，但当ADCC，ADCP和/或CDC有害时，例如当抗体的功能为（i）时，具有良性免疫沉默Fc的抗体比天然Fcs更具优势细胞因子的全身性中和剂，（ii）在免疫细胞的细胞表面抗原的阻断剂，或（iii）在邻近效应的免疫细胞的双特异性衔接器靶向患病细胞86，87，88。因为最好不要通过FcγRs交联刺激不希望的免疫细胞枯竭，所以由于患者之间FcγRs激活阈值的变化，完全沉默Fc效应子功能至关重要。减少效应子功能的一种方法是去除N-连接的通过在与其他残基位置297取代天冬酰胺残聚糖89，90，91，92。另一种策略是将氨基酸突变整合到负责FcγR或C1q结合的残基中93。例如，ORTHOCLONE OKT3 ®，第一销售的治疗性抗体，包含两个突变，L234A和L235A，在Fc结构域以最小化由细胞因子毒性94。将Fab区移至与FcγR紧密结合的其他IgG亚类（例如IgG2或IgG4）可能是另一个选择64。而且，在IgG亚类之间交换氨基酸残基导致具有减少的补体和Fcγ受体结合的更多Fc选择，例如IgG2 / 4 95，IgG2m4 96和“ TM”（L234F，L235E和P331S）97。在詹森的研究和开发的研究人员利用了多种方法来消除与FcγR和C1q的亲和力与FcγR的和体C1q介导的检测不到的效应功能来生成IgG2σ 98。出于安全考虑，由于效应子激活阈值在疾病和人群之间是可变的，因此出于安全考虑，正在使用不同的方法（例如脯氨酸三明治99）持续进行使Fc缺乏效应子功能的广泛尝试。

与血液循环中的其他血清蛋白相比，IgG抗体具有可延长血清稳定性（21天）的优势。FcRn存在于循环单核细胞或内皮细胞的内体中，是负责通过其pH依赖性结合特征控制哺乳动物血清IgG水平的关键分子100。底层IgG抗体如何可以再循环或通过内皮胞转机制已经建立101，102（图2）。

当IgG被内皮细胞或循环单核细胞内在化时，它们最初会在早期酸化的内体中遇到FcRn。这种结合可以防止IgG被分类为溶酶体，而没有FcRn结合的血清蛋白将被降解。取而代之的是，IgG被再循环回到细胞外空间44。在细胞表面呈中性pH值时，IgG立即从FcRn解离并返回循环。

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在pH 6.0，FcRn的结合到C ħ 2-C ħ IgG的Fc区的3铰链区以微摩尔亲和力103，104。然而，它在生理pH下不能测量地结合于IgG。在通过内皮细胞和循环单核细胞通过胞吞作用使血清IgG内化后，FcRn与酸性内体区室中的IgG结合（图2）。然后，FcRn在生理pH值下将IgG循环回到循环中，从而延长了其血清半衰期，而未与FcRn结合的血清蛋白则针对溶酶体降解。与通过FcRn循环进入血清的单体IgG相比，聚合IgG（例如被与抗原结合的多个IgG分子包围的IC）已被证明通过未知的作用机制有效地导入溶酶体55。通过区分IgG，无论是单体还是聚合IgG，FcRn均可确定IgG的命运，以保护其或指导其降解以用于抗原呈递目的。除了ICs相对于单体IgGs的降解增强外，还显示FcRn通过调节细胞内IgG ICs的分类来交叉呈递降解的抗原，从而交叉引发CD8 +细胞毒性T细胞反应59。

在非人灵长类动物中广泛研究105，106和在人FcRn转基因小鼠中107，108已经表明，IgG Fc的工程更高FcRn结合是非常重要的用于增强治疗性抗体的半衰期。还已经广泛研究了在内体pH下用于更高FcRn结合的Fc工程。由Medimmune使用噬菌体展示109分离的M252Y / S254T / T256E（YTE）变体在pH 6.0时对人FcRn的亲和力比野生型IgG1高10倍，在pH 7.4时有效释放。含有YTE突变的IgG抗体在人FcRn转基因小鼠中的药代动力学（半衰期）提高了3.8倍，在食蟹猴中提高了2.5倍（105），110，111。但是，YTE表现出降低的ADCC活性。Medimmune YTE已适应抗RSV抗体Fc，该药物已获得FDA的快速通道认证以预防呼吸道疾病，名称为MEDI8897，目前正在进行IIb期临床评估111。另一个公司团体Xencor开发了一种工程化的变体Xtend（M428L / N434S），在pH 6.0时，FcRn的结合力是野生型IgG1的11倍。Xtend在转基因小鼠中的血清半衰期提高了4.2倍，在非人灵长类动物中的血清半衰期提高了3.2倍。Xtend Fc在异种移植小鼠模型中进行了测试，该模型将人FcRn表达为抗VEGF或抗EGFR IgG1抗体，与野生型IgG1 108相比，可延长血清半衰期并降低肿瘤负荷。Xtend已适应于ravulizumab（ALXN1210），该药物已于2018年12月获得美国FDA批准用于治疗阵发性夜间血红蛋白尿/溶血性尿毒症综合征112或VRC01LS，目前正在临床评估中，以预防人类免疫缺陷病毒113。这些研究表明，延长工程IgG抗体在血液循环中的血清稳定性可以延长治疗或保护活性，从而避免了频繁施用抗体药物的需要。

在某些情况下，当与具有消除的效应子功能的“良性阻断剂”组合使用时，Fc具有延长的半衰期特性是合乎需要的，这在概述抗体工程效应子功能的部分中进行了描述。Borrok等。Medimmune的研究人员描述了两种变体的组合的分子稳定性：“ TM”（L234F，L235E和P331S）缺乏免疫受体结合97和“ YTE”（M252Y，S254T和T256E）具有延长的血清半衰期寿命105。此外，他们解剖了TM-YTE各个突变的作用，进而阻碍了热稳定性，然后发现了一种新的组合FQQ-YTE（L234F，L235Q，K322Q，M252T，S254T和T256E），具有改善的分子和血清稳定性利用合理的蛋白质工程设计114。

除了调节对Fc受体的亲和力以外，也正在广泛地寻求用于更好的治疗功效的Fc工程学努力。一个实例是工程化的Fc，它不形成同型二聚体，而是以可溶单体mFc的形式保留，具有一半大小，显示（i）对FcγRI的亲和力高，（ii）无法检测到与FcγRIIIa的结合，和（iii）类似的pH-依赖FcRn结合115，116。该工程集中于降低Fc的分子量以简化治疗。然而，mFc可以非特异性结合几种病毒或癌症相关蛋白，例如HIV-1的gp140，寨卡病毒的EDII，间皮素，5T4，PD-L1，OX40和TIM3。非特异性结合已被噬菌体展示库筛选排除，并且已鉴定出T366R和L368H在构建单体状态中的关键作用117。

用于异源二聚体Fc的Fc工程改造是获得抗原结合的双特异性性质以规避同源二聚体形成的另一个实例。双特异性抗体识别两种不同的抗原，因此它们不仅中和可溶性的致病性或内源性蛋白质，而且还可以将离散抗原共同连接在同一细胞上或与未连接的细胞接合，从而获得治疗上有利的状态。迄今为止，已经采用了三种策略性方法来在Fc域中实现异二聚体结构：（i）空间互补设计，通常称为“球形入孔”；（ii）收费互换；和（iii）同种型链交换118，119，120。两个双特异性单克隆抗体是目前市场上：emicizumab（Hemlibra ®）和blinatumomab（Blincyto ®）。由Chugai Pharmaceutical开发的Emicizumab是对凝血因子IX和X具有双特异性的IgG4突入孔，可模仿凝血因子VIII（FVIII）的活性，并且在药代动力学方面比FVIII更好（艾米珠单抗为21天，而0.5天FVIII）121。所述Fc改造的双特异性IgG4抗体，emicizumab已经用于预防，防止或减少对2017年11月出血患者血友病A发作的频率由FDA批准122，123，124。这项针对双特异性的Fc工程技术实现了两种不同抗原的共连接，并开辟了新的治疗机会，从而保持了mAb的所有有益特性。

另一种上市的双特异性抗体是blinatumomab，这是靶向T淋巴细胞上的CD3和肿瘤细胞上的CD19的两个单链Fv的融合体，于2014年12月被FDA批准。尽管它们具有显着的功效，目前的双特异性T细胞接合剂（BiTE）程序的血清半衰期少于1天，因此需要每个周期连续28天连续静脉输注。因此，Amgen目前正在通过融合Fc域来推进BiTE分子的新版本。然而，事实证明卡妥索单抗，双特异性单克隆抗体对CD3，和EpCAM已经大概是因为Fc与FcγR的或Clq结合撤回由于毒性问题，125，126，127，128，表明对于T细胞参与者，FcγR相关的效应子功能在临床方面是有害的。因此，至少在BiTE的情况下，用于半衰期延长的简单Fc融合可能会导致副作用，例如毒性和/或功效缩短。用于免疫沉默的Fc工程或进一步的蛋白质工程对于免疫细胞结合抗体也是必不可少的。

学术界和工业界的研究人员已经开展了利用Fc工程技术调节抗体效应子功能的广泛研究和开发129。尽管做出了这些努力，但Fc的确切功能仍有待验证。例如，FcγRIIIa在NK细胞上的功能是ADCC活性的关键因素，但在其他淋巴细胞（如单核细胞和巨噬细胞）上的功能尚不清楚。特别是，在感染性疾病，如抗病毒活性的保护的Fc功能，已经越来越受到关注130，131，这表明除了中和IgG抗体的活性外，它还负责诱导体液和细胞反应，这些反应可提供保护性免疫力，如疫苗样作用。Fc工程师还开发了一些具有更严格的pH依赖性FcRn结合的Fc变体，例如YTE和Xtend，它们在临床环境中用作抗感染剂或抗自身免疫疾病132。通过使用复杂的Fc工程技术开发的双特异性抗体的最新批准，该工程产生了异二聚Fcs与同二聚Fcs的最大比例，表明双特异性抗体具有极高的治疗应用潜力，并且仍有很大的改进空间可以满足未满足的医疗需求，例如如在药代动力学或组织浸润中，同时保持低毒性。尽管由于受体在离散白细胞上的多样性而对Fc受体的功能知之甚少，但Fc工程仍致力于（i）在肿瘤靶向目的中通过选择性FcγR亲和力改善效应子功能，（ii）通过pH最大化血清半衰期对多种疾病类别（例如癌症，传染病或自身免疫疗法）的选择性FcRn亲和力，（iii）通过阻断同型二聚作用，将分子缩小至天然抗体的一半，并且（iv）通过最大化Fc异二聚作用的效率赋予双特异性。这些是扩大抗体治疗应用的强大策略。此外，包含已针对适应性免疫优化了Fc功能的抗体的IC是未来癌症疫苗和治疗的潜在候选者133，134。