方案
脱蜡/补液
在65℃的烘箱中脱蜡1小时。
使用以下一系列洗涤液去石蜡/水合物：两次二甲苯洗涤（每次5分钟），然后两次100％乙醇冲洗（每次5分钟），接着是95％乙醇，70％乙醇，50％乙醇，30％乙醇，然后在摇床上用H 2 O和TBST洗涤5分钟。
抗原检索
将载玻片浸入含有抗原修复溶液的染色皿中。
将盖好的染色盘放入电饭煲中。加入120 mL d H2O并按“煮”。
当“烹饪”变为“保温”（约20-30分钟）时，将染色皿移到工作台，让盖子冷却20分钟。
染色
在摇床上用TBST洗涤载玻片5分钟。
通过用3％过氧化氢覆盖组织10分钟来灭活内源性过氧化物酶。
用TBST洗涤载玻片三次（每次在振荡器上3分钟）。
用封闭溶液封闭载玻片1小时。
根据说明书的建议，在封闭缓冲液中稀释一抗。
将一抗应用于每个切片，并在加湿室（4 ℃）中孵育过夜。
用TBST洗涤载玻片三次（每次在振荡器上3分钟）。
根据制造商的建议，对封闭溶液中稀释的二级HRP-缀合的抗兔抗体应用于每个部分;在室温下孵育1小时。
用TBST洗涤载玻片三次（每次在振荡器上3分钟）。
将新制备的DAB底物添加到切片中。
在室温下将组织切片与底物孵育直至形成合适的染色（通常2-5分钟）。
用水冲洗切片。
与苏木精对抗。
用水冲洗切片。
使用100％乙醇（每次冲洗20次浸渍）两次冲洗使样品脱水，然后用二甲苯冲洗两次（每次冲洗30次）。
使用中性树胶封片剂在载玻片上安装盖玻片。
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