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IHC实验指南(一)

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发表时间:2018-10-10 15:18作者:武汉新启迪Xinqidi来源:http://www.qidibio.com

IHC实验指南


石蜡包埋组织的免疫组织化学方案


解决方案和试剂

二甲苯

乙醇,无水变性,组织学等级(100%,95%,70%)

洗涤缓冲液:

TBST洗涤缓冲液:1XTBS / 0.1%Tween-20

为制备10X TBS的储备溶液:将24.2g Trizma碱和80g氯化钠加入1L dH2O中。将pH调节至7.6。

工作溶液:1XTBST / 0.1%吐温-20:将100ml 10XTBS加入900ml dH2O中。加入1 ml Tween-20并充分混合。

蒸馏水(dH2O)

抗原检索解决方案:

0.01M柠檬酸钠缓冲液,pH6.0

制备储备溶液:溶液A. 0.1M柠檬酸溶液:将21.0g柠檬酸,一水合物(C 6 H 8 O 7·H 2 O)溶解在100ml dH 2 O中。溶液B. 0.1M柠檬酸钠溶液:将29.4g柠檬酸三钠二水合物(C 6 H 5 Na 3 O 7·2H 2 O)溶于100ml dH 2 O中。

工作溶液:将9ml储备溶液A和41ml储备溶液B加入450ml dH2O中。将pH调节至6.0。

3%Hydrogene Peroxide

阻止缓冲区:

1xPBS:通过将8g NaCl,0.2g KCl,1.44g Na 2 HPO 4和0.24g KH 2 PO 4溶解在800ml蒸馏水中制备该缓冲液。然后用HCl调节pH至7.4,并加入H2O至1升。加入10%血清制成最终的封闭缓冲液(血清来源取决于二抗的宿主)


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