您好,请问有什么可以帮到您的。 点击这里给我发消息
武汉新启迪生物科技有限公司
新启迪-您的生物科研好伙伴!
本企业通过iso9001质量体系认证

WB抗体常见问题(一)

 二维码
发表时间:2018-09-26 15:01作者:武汉新启迪Xinqidi来源:http://www.qidibio.com
问题原因解决方案
条带形状异常胶凝的不均匀,聚合不好灌胶前将溶液充分混匀
上样齿扭曲使上样孔大小不一上样前用针头将齿拨正,注意不要将针头插入胶内
某些样品盐浓度较高除盐或将样品盐浓度调成一致
每孔上样量不一致调整上样量使基本一致
缓冲液陈旧,成分改变重新配置,充分混匀
凝胶下面有气泡电泳前先将气泡赶走
电泳时温度过高降低电流或电压
目的蛋白信号弱样品上样量不足或目的蛋白浓度过低加大上样量或浓缩样品
转膜效率低重新转膜
抗体浓度低增加抗体浓度或延长孵育时间
显色剂底物浓度不足增加显色剂用量,充分混匀
显色剂失效更换显色剂,充分混匀
显色或曝光时间不足延长显色或曝光时间
转膜效率低转膜缓冲液pH值与目的蛋白等电点相近提高转膜缓冲液pH值
凝胶与膜之间存在气泡转膜前要排尽气泡
凝胶与转印膜两侧滤纸大面积接触滤纸、转印膜和凝胶大小要基本一致,避免滤纸直接接触
转印膜种类选择不当使用质量可靠的PVDF膜或硝酸纤维素膜
电压或电流过小湿转时20mA恒流,半干转时25V左右恒压
转印时间过长或过短,蛋白还在凝胶中或穿透转印膜先电泳,根据蛋白大小及转印装置选择合适的转印时间
湿转过程中环境温度过高使用预冷的转膜缓冲液或将装置至于4度


文章分类: 抗体技术资料
分享到:
武汉新启迪生物科技有限公司联系邮箱:
service@qidibio.com  techsupport@qidibio.com  
武汉新启迪生物科技有限公司咨询客服:周一至周五8:30-17:30
联系我们
服务保障                        支付方式
武汉新启迪生物科技有限公司联系电话:
027-87610298
027-87610297