白介素-31促进系统性硬化症的纤维化和T辅助2极化

a测定dcSSc患者血清IL-31水平(n=55)，LcSSc患者(n=19)，以及健康对照者(n=14)用一种特殊的ELISA试剂盒。水平线代表平均值。断线表示截止值(健康对照组的平均值+2sd).**p < 0.01 and ***p < 0.001 vs. healthy controls. Significance was evaluated by two-tailed Mann–Whitney U测试一下。精确性p值=0.00002(sc对ctrl)、0.000008(dcssc对ctrl)、0.008(lcssc对ctrl)。健康对照者b本文分析了SSC患者血清IL-31水平与以下指标的相关性。nMRSS、%VC、%DLCO、血清IL-4、IL-6、IL-13水平。采用Spearman秩相关检验进行相关分析。精确性p值=0.000000005(MRSS)；0.005(%VC)；0.033(%DLCO)；0.012(IL-4)；0.00003(IL-6)；0.026(IL-13)。源数据作为源数据文件提供。

a相对mRNA表达水平IL 31和IL31RA对SSC患者皮肤进行实时PCR分析(n=10)和健康对照组(n=6)。精确p值=0.0002(IL 31); 0.0002 (IL31RA)。相对折差=2.37(IL 31); 3.89 (IL31RA). bSSC患者和健康对照组(标度bar=20m)皮肤中IL-31(顶部，红色)，IL-31RA(底部，红色)，FSP-1(绿色)和细胞核(DAPI，蓝色)的典型双免疫荧光图像。结果表明，这是三个独立实验的代表，具有相似的结果。c, d。相对mRNA水平(c)和蛋白质水平(d)SSC患者和健康对照组DFS中IL-31和IL-31 RA的表达(n分别用实时PCR法和ELISA法测定。精确p值=0.007(IL 31); 0.0006 (IL31RA)；0.004(IL-31)；0.0006(IL-31RA)。相对折差=2.05(IL 31); 3.13 (IL31RA)。E.相对mRNA表达水平IL 31和IL31RA用实时PCR法检测IL-4或IL-13刺激的SSC DFS(n分别=5)。精确p值(IL-40.1ng/ml与介质、IL-41ng/ml与介质、IL-410ng/ml与介质、IL-130.1ng/ml与媒体、IL-131ng/ml与媒体相比)=0.841、0.008、0.008、0.151、0.841、0.548(IL 31); 0.310, 0.008, 0.008, 0.999, 0.008, 0.008 (IL31RA)。相对倍差(IL-40.1ng/ml、IL-41ng/ml、IL-410ng/ml、IL-130.1ng/ml、IL-131ng/ml、IL-1310ng/ml)=1.02、2.92、6.78、1.13、0.98、1.08(IL 31); 1.16, 5.36, 13.91, 1.01, 3.15, 4.76 (IL31RA)。数据以平均值±SD表示。*p < 0.05, **p < 0.01, and ***p < 0.001 vs. healthy controls (a, c，和d)或媒体(e)。意义是由两尾曼恩-惠特尼决定的。U测试一下。健康对照者。源数据作为源数据文件提供。

a, bDcSSc患者和健康对照组的dfs培养24h，用rhIL-31(0，10，25，50或100 ng/ml)进行检测。Col1a1和Col1a2MRNA表达a)和I型胶原蛋白的产生(b)分别采用实时PCR法和ELISA法。精确性p值(Ctrl+IL-31 10 ng/ml vs Ctrl，Ctrl+IL-31 25 ng/ml vs Ctrl，Ctrl+IL-31 50 ng/ml vs Ctrl，Ctrl+IL-31 100 ng/ml vs Ctrl，SSC+IL-31 10 ng/ml vs SSC，SSC+IL-31 25 ng/ml vs SSC，SSC+IL-31 50 ng/ml vs SSC，SSC+IL-31 100 ng/ml vs SSC)=0.690，0.095，0.056，0.008，0.032，0.016，0.008，0.008(Col1a1); 0.421, 0.421, 0.222, 0.016, 0.008, 0.008, 0.008, 0.008 (Col1a20.508，0.127，0.841，0.008，0.008，0.008，0.008，0.008(I型胶原蛋白)。相对差异(Ctrl+IL-31 10 ng/ml，Ctrl+IL-31 25 ng/ml，Ctrl+IL-31 50 ng/ml，Ctrl+IL-31 100 ng/ml，SSC+IL-31 10 ng/ml，SSC+IL-31 50 ng/ml，SSC+IL-31 50 ng/ml，SSC+IL-31 100 ng/ml)=1.10，1.16，1.19，1.53，1.47，2.10，2.24，2.71，2.86(Col1a1); 1.11, 1.10, 1.31, 1.54, 1.83, 2.35, 2.54, 2.75, 3.25 (Col1a2). c用ELISA法检测rhIL-31(50 ng/ml)处理的dcSSc DFS上清液中TGF-β1、CTGF、MMP-1、MMP-3和MMP-9的蛋白水平。精确p值分别为0.008(TGF-β1)、0.587(MMP-1)、0.008(MMP-1)、0.016(MMP-3)、0.024(MMP-9).dRhIL-31(50 ng/ml，左)对dcSScDFS中α-SMA的代表性Westernblot分析。β-肌动蛋白表达的定量(右)。精确性p值=0.008。e相对mRNA表达水平Acta 2用实时PCR方法检测rhIL-31(50 ng/ml)对dcSSc型DFS的影响。精确性p值=0.008。相对褶皱差=2.85。f用ELISA法测定rhIL-31(50 ng/ml)处理的dcSSc DFS的BrdU掺入量。在450 nm处测定吸光度。精确性p值=0.008。g用rhIL-31(50 ng/ml)治疗dcSSc患者的DFS，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。有代表性的点图显示(左)。附件五+，7-AAD−细胞被认为是早期凋亡细胞，Annexin-V+，7-AAD+细胞分别被认为是晚期凋亡细胞(右)。精确p值(IL-31 vs培养基)=0.008(早期凋亡)；0.008(晚期凋亡).hDcSSc患者和健康对照组的DFS用丝裂霉素C预处理，划伤造成伤口，单独用rhIL-31(50 ng/ml)或培养基孵育24h。显示具有代表性的显微图像(左，标度为500 m)。红线显示伤口的边界。创面闭合表示为创面缩小的百分比(右)。精确p值(Ctrl+媒体与Ctrl+IL-31，Ctrl+媒体与SC+媒体，Ctrl+媒体与SSC+IL-31，Ctrl+IL-31与SC+IL-31，Ctrl+IL-31 vs SC+IL-31，SC+媒体对SC+IL-31)=0.005，0.0000001，0.00000000006，0.00008，0.000000004，0.00002。i, j用rhIL-31(50 ng/ml)或单纯培养24h，检测dcSSc患者血清中IL-6、IL-33和ccl 2的表达水平。i)和ELISA(j)。精确p值=0.008(IL6); 0.032 (IL 33); 0.008 (CCL 2)；0.008(IL-6)；0.032(IL-33)；0.008(CCL 2)。相对折差=1.99(IL6); 1.37 (IL 33); 2.39 (CCL 2)。N=5。数据以平均±SD表示。*p < 0.05, **p < 0.01, and ***p < 0.001 vs. unstimulated Ctrl or SSc fibroblasts (a, b)或媒体(C-g, i，和j)。意义是由两尾曼恩-惠特尼决定的。U试验(阿格, i，和j)和单向方差分析，然后是Tukey的事后比较检验(H)。Ctrl，健康对照；OD，光密度。源数据作为源数据文件提供。

aRhIL-31处理的dcSSc DFS中STAT 1、STAT 3、STAT 5及其磷酸化形式的代表性westernblot分析(50 ng/ml，左)。β-肌动蛋白表达的定量(右)。精确p值(10 min vs 0 min，20 min vs 0 min)=0.008，0.008(pSTAT 1/STAT 1)；0.008，0.008(pSTAT 3/STAT 3)；0.016，0.040(pSTAT 5/STAT 5)。相对折叠差(10 min，20 min)=3.63，3.34(pSTAT 1/STAT 1)；2.11，7.23(pSTAT 3/STAT 3)；1.36，1.35(pSTAT 5/STAT 5)。b具有代表性的dcSSc DFS芯片检测磷酸化STAT 3与Col1a2增强剂(左)免疫沉淀染色质用特异性引物进行实时PCR分析。Col1a2增强剂(右)精确性p值=0.029。n=4项独立于生物的实验。c用ELISA法检测转染IL-31RA siRNA并经rhIL-31(50 ng/ml)处理的dcSSc DFS上清液中I型胶原、IL-6、IL-33和CCL 2蛋白水平。精确p值=0.00000009，0.111，0.0000008(I型胶原)；0.0000009，0.202，0.000007(IL-6)；0.002，0.766，0.005(IL-33)；0.000003，0.222，0.00002(CCL 2)。dELISA法检测转染OSMR siRNA或STAT 1抑制剂(STAT 1-I：fludarabine；50 M)、STAT 3(STAT-Ⅰ：Stattic；5 M)或STAT 5(STAT 5-I：CaS 285986-31-4；50 M)的dcSSc DFS上清液中Ⅰ型胶原蛋白水平，然后用rhIL-31(50 ng/ml)处理。精确性p值=0.238(IL-31+OSMR siRNA对IL-31)，0.175(IL-31+STAT 1-I vs IL-31)，0.008(IL-31+STAT 3-I vs IL-31)，0.548(IL-31+STAT5-I vs IL-31)。n=5生物独立实验，除非另有说明。数据以平均值±SD表示。*p < 0.05, **p < 0.01, and ***p < 0.001. Significance was determined using two-tailed Mann-Whitney U试验(a, b，和d)和单向方差分析，然后是Tukey的后特别比较检验(c)。PSTAT 1，磷酸化STAT 1；pSTAT 3，磷酸化STAT 3；pSTAT 5，磷酸化STAT 5。源数据作为源数据文件提供。

a空白对照组(PBS-Ctrl)和空白对照组(PBS-Ctrl)分别于第1~14天给予rmIL-31或生理盐水作为假手术组，并于第15天进行分析。b用苏木精和伊红染色(左)和马尾松三色染色(右)显示典型的皮肤和肺组织切片(皮肤水平比例尺=100μm，肺染色20 m)。带有箭头的垂直条表示真皮厚度。组织学检查皮肤厚度和肺纤维化评分。确切p值(PBS-Ctrl+Sham vs PBS-Ctrl+IL-31，PBS-Ctrl+Sham vs BLM-SSC+Sham，PBS-Ctrl+Sham vs BLM-SSC+IL-31，PBS-Ctrl+IL-31 vs BLM-SSC+Sham，PBS-Ctrl+IL-31 vs BLM-SSC+IL-31，BLM-SSC+SSC-31)=0.003，0.00001，0.0000000005，0.049，0.00000006，0.000004(真皮厚度)；0.009，0.0000003，0.00000000004，0.0001，0.000000001，0.000003(肺纤维化评分)。c皮肤和肺组织羟脯氨酸含量。确切p值(PBS-Ctrl+Sham vs PBS-Ctrl+IL-31，PBS-Ctrl+Sham与BLM-SSC+Sham，PBS-Ctrl+Sham vs BLM-SSC+IL-31，PBS-Ctrl+IL-31 vs BLM-SSC+Sham，PBS-Ctrl+IL-31 vs BLM-SSC+IL-31，BLM-SSC+SSC-31)=0.036，0.00007，0.0000001，0.027，0.00001，0.004(皮肤)；0.015，0.00003，0.0000001，0.025，0.00002，0.011(肺)。d相对mRNA表达水平Col1a1和Col1a2对皮肤和肺组织进行实时PCR检测。精确性p=0.004，0.000000002，0.00000000004，0.0000004，0.000000003，0.005=0.004，0.000000002，0.00000000004，0.0000004，0.005(Col1a1，0.033，0.000000002，0.000000000002，0.00000006，0.00000000002，0.000005(Col1a2，0.046，0.00004，0.00000001，0.011，0.0000006，0.0003(Col1a1，0.006，0.000002，0.000000007，0.002，0.000001，0.004(Col1a2、肺)。相对折叠差(PBS-Ctrl+IL-31，BLM-SSC+Sham，BLM-SSC+IL-31)=1.86，3.78，4.61(Col1a1、1.86、4.87、7.03(Col1a2，1.47，2.05，2.91(Col1a1、1.54、2.14、2.69(Col1a2、肺)。e采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测皮肤和肺组织I型胶原蛋白水平。确切p值(PBS-Ctrl+Sham vs PBS-Ctrl+IL-31，PBS-Ctrl+Sham与BLM-SSC+Sham，PBS-Ctrl+Sham vs BLM-SSC+IL-31，PBS-Ctrl+IL-31 vs BLM-SSC+Sham，PBS-Ctrl+IL-31 vs BLM-SSC+IL-31，BLM-SSC+SSC-31)=0.048，0.00004，0.00000001，0.011，0.0000006，0.0003(皮肤)；0.029，0.000005，0.000000004，0.002，0.0000002，0.0004(肺)。f相对mRNA表达水平IL 31和IL31RA对皮肤和肺组织进行实时PCR检测。精确p值=0.008(IL 31，皮肤)；0.008(IL31RA，皮肤)；0.008(IL 31，肺)；0.008(IL31RA、肺)。相对褶皱差=5.49(IL 31，皮肤)；3.48(IL31RA，皮肤)；2.51(IL 31、肺)；1.98(IL31RA、肺)。n数据以平均值±SD表示。*p < 0.05, **p < 0.01, and ***p < 0.001. Significance was determined using one-way analysis of variance followed by Tukey’s post hoc comparison test (b–e)和两尾曼恩-惠特尼U试验(F)结果表明，这是三个独立实验的代表，具有相似的结果。PBS-Ctrl，PBS处理对照。源数据作为源数据文件提供。

a相对mRNA表达水平IL4, IL6, IL 10, IL17A, 肿瘤坏死因子, Tgfb 1，和IFNG对皮肤和肺组织进行实时PCR检测。精确p值(pbs-ctrl+sham vs pbs-ctrl+IL-31，pbs-ctrl+sham vs blm-ssc+sham，pbs-ctrl+sham vs bm-ssc-sc-31，pbs-ctrl+IL-31 vs blm-ssc+sham，pbs-ctrl+IL-31 vs blm-ssc+IL-31，bbs-ctrl+sham-ssc+IL-31)=0.866，0.039，0.00006，0.162，0.0003，0.021(IL4，0.403，0.00000000006，0.0000000000002，0.0000000003，0.0000000000004，0.000001(IL6，0.034，0.004，0.000003，0.699，0.0007，0.007(IL 10，0.926，0.000007，0.0000005，0.00002，0.000001，0.344(IL17A，0.977，0.012，0.063，0.005，0.029，0.832(肿瘤坏死因子，0.572，0.0001，0.00000001，0.001，0.00000008，0.0001(Tgfb 1，0.428，0.00007，0.002，0.001，0.040，0.361(IFNG，0.00008，0.003，0.0000002，0.286，0.008，0.0002(IL4，0.023，0.00001，0.0000001，0.007，0.00002，0.038(IL6，0.002，0.227，0.00003，0.085，0.231，0.002(IL 10，0.192，0.000008，0.000001，0.0004，0.00005，0.686(IL17A，0.641，0.013，0.041，0.127，0.321，0.937(肿瘤坏死因子，0.967，0.0002，0.0000005，0.0005，0.000001，0.014(Tgfb 1，0.973，0.00003，0.0001，0.00007，0.0003，0.868(IFNG、肺)。相对折叠差(PBS-Ctrl+IL-31，BLM-SSC+Sham，BLM-SSC+IL-31)=1.55，3.12，5.45(IL4、2.14、13.09、19.11(IL6、2.59、3.15、5.16(IL 10，1.22，3.63，4.24(IL17A、0.89、1.97、1.74(肿瘤坏死因子、1.34、2.57、4.12(Tgfb 1、1.68、3.71、2.98(IFNG、3.59、2.81、5.20(IL4、5.56、10.92、15.12(IL6、2.29、1.56、2.85(IL 10、2.35、5.74、6.45(IL17A，1.27，1.81，1.68(肿瘤坏死因子、1.16、2.98、4.22(Tgfb 1、1.22、4.34、3.95(IFNG、肺)。bELISA法检测转化生长因子-β1的蛋白水平.确切p值(PBS-Ctrl+Sham vs PBS-Ctrl+IL-31，PBS-Ctrl+Sham与BLM-SSC+Sham，PBS-Ctrl+Sham vs BLM-SSC+IL-31，PBS-Ctrl+IL-31 vs BLM-SSC+Sham，PBS-Ctrl+IL-31 vs BLM-SSC+IL-31，BLM-SSC+SSC-31)=0.924，0.00006，0.0000003，0.0002，0.0000007，0.022(皮肤)；0.805，0.00003，0.0000004，0.0002，0.000002，0.076(肺)。c, d相对mRNA水平和蛋白质水平CTGF用实时聚合酶链反应(PCR)进行评价。c)和ELISA(d)分别。精确p值(pbs-ctrl+sham vs pbs-ctrl+IL-31，pbs-ctrl+sham vs blm-ssc+sham，pbs-ctrl+sham vs bm-ssc-sc-31，pbs-ctrl+IL-31 vs blm-ssc+sham，pbs-ctrl+IL-31 vs blm-ssc+IL-31，bbs-ctrl+sham-ssc+IL-31)=0.912，0.000000003，0.0000000005，0.000000007，0.000000001，0.391(CTGF，0.967，0.00000007，0.000000009，0.0000001，0.00000002，0.393(CTGF；0.972，0.00006，0.00002，0.00003，0.00001，0.941(CTGF，皮肤)；0.933，0.005，0.006，0.017，0.019，0.999(CTGF，肺)。相对折叠差(PBS-Ctrl+IL-31，BLM-SSC+Sham，BLM-SSC+IL-31)=1.14，3.79，4.13(皮肤)；1.12，3.86，4.30(肺)。e相对mRNA表达水平Mmp3, MMP 9, Mmp13, TIMP 1, Timp2，和TIMP 3采用实时PCR技术对BLM-SSC小鼠肺组织进行检测.精确p值=0.008(Mmp3); 0.016 (MMP 9); 0.008 (Mmp13); 0.008 (TIMP 1); 0.008 (Timp2); 0.008 (TIMP 3)。相对折差=0.79(Mmp3); 0.72 (MMP 9); 0.68 (Mmp13); 2.06 (TIMP 1); 1.42 (Timp2); 1.26 (TIMP 3). n数据以平均值±SD表示。*p < 0.05, **p < 0.01, and ***p < 0.001. Significance was determined using one-way analysis of variance followed by Tukey’s post hoc comparison test (a-d) and two-tailed Mann–Whitney U试验(e)。结果表明，这是三个独立实验的代表，具有相似的结果。PBS-Ctrl，PBS处理对照。源数据作为源数据文件提供。

a–c用流式细胞术检测rmIL-31和假手术(rmIL-31)处理的BLM-SSC和PBS-Ctrl小鼠的Th1、Th2、Th17和Treg细胞频率。a)、肺(b)和肺引流淋巴结(c)。精确性pPBS-Ctrl+Sham vs PBS-Ctrl+IL-31，PBS-Ctrl+Sham vs BLM-SSC+Sham，PBS-Ctrl+Sham与BLM-SSC+IL-31，PBS-Ctrl+IL-31 vs BLM-SSC+SHAM，PBS-Ctrl+IL-31 vs BLM-SSC+IL-31，BLM-Ctrl+SSC+IL-31=0.960，0.417，0.996，0.145，0.841，0.625(Th1，脾脏)；0.017，0.0002，0.00000000007，0.342，0.00000001，0.0000003(Th2，脾)；0.795，0.005，0.000006，0.059，0.00006，0.041(Th17，脾脏)；0.001，0.0000001，0.008，0.002，0.926，0.0003(Treg，脾脏)；0.521，0.005，0.00002，0.079，0.0002，0.043(Th2/Th1比值，脾脏)；0.206，0.00005，0.0007，0.003，0.044，0.521(Th17/Treg比值，脾脏)；0.007，0.011，0.000004，0.996，0.006，0.004(Th2/Treg比值，脾脏)；0.966，0.932，0.996，0.999，0.904，0.849(Th1，肺)；0.018，0.0003，0.00000002，0.233，0.000003，0.00009(Th2，肺)；0.633，0.005，0.00002，0.059，0.0002，0.039(Th17，肺)；0.005，0.0000002，0.00002，0.0002，0.050，0.048(Treg，肺)；0.031，0.0007，0.0000002，0.264，0.00002，0.0007(Th2/Th1比值，肺)；0.363，0.0002，0.000003，0.005，0.00005，0.125(Th17/Treg比率，肺)；0.034，0.0002，0.00000005，0.082，0.000004，0.0005(Th2/Treg比值，肺)；0.939，0.488，0.961，0.221，0.719，0.772(Th1，肺引流淋巴结)；0.038，0.000009，0.000000006，0.002，0.000000001，0.0000003(Th2，肺引流淋巴结)；0.839，0.010，0.00001，0.051，0.00005，0.013(Th17，肺引流淋巴结)；0.057，0.000001，0.001，0.0002，0.230，0.009(Treg，肺引流淋巴结)；0.225，0.00008，0.000000005，0.004，0.00000006，0.00003(Th2/Th1比值，肺引流淋巴结)；0.398，0.00003，0.000001，0.0005，0.00001，0.244(Th17/Treg比率，肺引流淋巴结)；0.011，0.00000007，0.000000000007，0.00002，0.0000000002，0.0000005(Th2/Treg比值，肺引流淋巴结)。d采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-4和IL-6水平.精确性pPBS-Ctrl+Sham vs PBS-Ctrl+IL-31，PBS-Ctrl+Sham与BLM-SSC+Sham，PBS-Ctrl+Sham与BLM-SSC+IL-31，PBS-Ctrl+IL-31 vs BLM-SSC+Sham，PBS-Ctrl+IL-31 vs BLM-SSC+IL-31，BLM-Ctrl+SSC+IL-31=0.129，0.001，0.000002，0.103，0.0001，0.019(-4)；0.085，0.032，0.00007，0.954，0.012，0.033(IL-6)。n数据以平均值±SD表示。*p < 0.05, **p < 0.01, and ***p < 0.001. Significance was determined using one-way analysis of variance followed by Tukey’s post hoc comparison test. The results shown are representative of three independent experiments with similar results. PBS-Ctrl, PBS-treated control. Source data are provided as a Source Data file.

a分别于第1、8、15天给予抗小鼠IL-31RA抗体(αIL-31RA)或同类型对照抗体(Iso)，并于第22天处死，以评价BLM-SSC和PBS处理对照组(PBS-Ctrl)小鼠的免疫功能。b用苏木精和伊红染色(左)和马尾松三色染色(右)显示典型的皮肤和肺组织切片(皮肤水平比例尺=100μm，肺染色20 m)。带有箭头的垂直条表示真皮厚度。组织学检查皮肤厚度和肺纤维化评分。精确p值(pBS-Ctrl+iso vs BLM-sSC+iso，pBS-ctrl+iso与BLM-sSC+αIL-31RA，BLM-sc+iso vsαIL-31RA)=0.00004，0.028，0.004(真皮厚度)；0.0000002，0.00002，0.00004(肺纤维化评分)。c皮肤和肺组织中羟脯氨酸的含量。精确性p值(pbs-ctrl+iso vs blm-ssc+iso，pbs-ctrl+iso vs blm-sc+αIL-31 RA，blm-sc+iso vs blm-sc+αIL-31 RA)=0.00005，0.052，0.003(皮肤)；0.00004，0.011，0.012(肺)。d相对mRNA表达水平Col1a1和Col1a2对皮肤和肺组织进行实时PCR检测。精确性p值(pbs-ctrl+iso vs bm-ssc+iso，pbs-ctrl+iso vs bm-ssc+αIL-31 ra，bbm-sc+iso vs bm-ssc+αIL-31 ra)=0.0000000003，0.00009，0.00000002(Co11a1，0.00000002，0.005，0.0000006(Co11a2，0.0000004，0.014，0.00002(Col1a1，0.0000002，0.001，0.00005(Col1a2、肺)。相对折叠差(BLM-SSC+iso，BLM-SSC+αIL-31RA)=4.21，2.00(Col1a1、皮肤)；5.64、2.27(Col1a2，2.62，1.50(Col1a1；3.08，1.86(Col1a2、肺)。e采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测I型胶原蛋白在皮肤和肺组织中的表达。精确p值(pbs-ctrl+iso vs blm-ssc+iso，pbs-ctrl+iso vs blm-sc+αIL-31 RA，blm-sc+iso vs blm-sc+αIL-31 RA)=0.0000002，0.021，0.000007(皮肤)；0.0000005，0.026，0.00002(肺)。fMRNA表达IL4, IL6, IL 10, IL17A, 肿瘤坏死因子, Tgfb 1，和IFNG采用实时PCR技术对小鼠皮肤和肺组织进行检测。精确p值(pbs-ctrl+iso vs bm-ssc+iso，pbs-ctrl+iso vs bm-sc+αIL-31 ra，blm-sc+iso vs blm-ssc+αIL-31 ra)=0.00001，0.002，0.015(IL4，0.0000005，0.0003，0.0007(IL6，0.0006，0.083，0.037(IL 10，0.0003，0.001，0.625(IL17A，0.00004，0.00005，0.996(肿瘤坏死因子，0.00000001，0.00006，0.00001(Tgfb 1，0.000003，0.000005，0.848(IFNG，0.0000001，0.0001，0.0001(IL4，0.000003，0.003，0.001(IL6，0.0005，0.251，0.010(IL 10，0.000000007，0.000000009，0.927(IL17A，0.003，0.002，0.997(肿瘤坏死因子，0.0000009，0.001，0.0005(Tgfb 1，0.00004，0.00002，0.943(IFNG、肺)。相对折叠差(BLM-SSC+iso，BLM-SSC+αIL-31RA)=4.19，2.83(IL4、皮肤)；18.09、10.01(IL6，皮肤)；5.75，3.15(IL 10，皮肤)；5.05，4.38(IL17A，皮肤)；2.57，2.55(肿瘤坏死因子、3.52、2.14(Tgfb 1，皮肤)；4.51，4.30(IFNG；5.00，3.01(IL4、17.72、8.92(IL6，2.56，1.50(IL 10；7.20，7.05(IL17A、2.17、2.19(肿瘤坏死因子、4.14、2.48(Tgfb 1、5.34、5.54(IFNG、肺)。n数据以平均值±SD表示。*p < 0.05, **p < 0.01, and ***p < 0.001. One-way analysis of variance followed by Tukey’s post hoc comparison test was used. The results shown are representative of three independent experiments with similar results. PBS-Ctrl, PBS-treated control; αIL-31RA, anti-mouse IL-31RA antibody; iso, isotype control IgG. Source data are provided as a Source Data file.

a–c用流式细胞术(FCM)检测抗小鼠IL-31RA抗体(αIL-31RA)和同型对照抗体(Iso)对BLM-sSC和pbs-ctrl小鼠Th1、Th2、Th17和Treg细胞的影响。a)、肺(b)和肺引流淋巴结(c)。精确性p值(pbs-ctrl+iso vs blm-ssc+iso，pbs-ctrl+iso vs bm-sSC+αIL-31 RA，blm-sc+iso vs blm-sc+αIL-31 RA)=0.649，0.769，0.978(Th1，脾)；0.0006，0.269，0.010(Th2，脾)；0.010，0.085，0.463(Th17，脾)；0.021，0.026，0.994(脾脏)；0.006，0.674，0.027(Th2/Th1比值，脾脏)；0.005，0.020，0.712(Th17/Treg比值，脾脏)；0.0002，0.042，0.019(Th2/Treg比率，脾脏)；0.547，0.830，0.878(Th1，肺)；0.000004，0.032，0.0002(Th2，肺)；0.002，0.005，0.768(Th17，肺)；0.042，0.040，0.999(Treg，肺)；0.00001，0.052，0.0006(Th2/Th1比值，肺)；0.006，0.010，0.957(Th17/Treg比值，肺)；0.0000003，0.003，0.00004(Th2/Treg比率，肺)；0.785，0.830，0.996(Th1，肺引流淋巴结)；0.000005，0.004，0.002(Th2，肺引流淋巴结)；0.015，0.012，0.988(Th17，肺引流淋巴结)；0.008，0.007，0.999(Treg，肺引流淋巴结)；0.00000005，0.0001，0.00005(Th2/Th1比值，肺引流淋巴结)；0.0008，0.0006，0.983(Th17/Treg比值，肺引流淋巴结)；0.000002，0.001，0.002(Th2/Treg比率，肺引流淋巴结)。d采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-4和IL-6水平.精确性p值(pbs-ctrl+iso vs blm-ssc+iso，pbs-ctrl+iso vs blm-sc+αIL-31 RA，blm-sc+iso vs blm-sc+αIL-31 RA)=0.00001，0.0007，0.031(IL-4)；0.0000008，0.0005，0.0009(IL-6)。n数据以平均值±SD表示。*p < 0.05, **p < 0.01, and ***p < 0.001. One-way analysis of variance followed by Tukey’s post hoc comparison test was used. The results shown are representative of three independent experiments with similar results. PBS-Ctrl, PBS-treated control; αIL-31RA, anti-mouse IL-31RA antibody; iso, isotype control IgG. Source data are provided as a Source Data file.