连接酶链反应

连接酶链反应

   连接酶链反应(ligase chain reaction,LCR)是继PCR后，新出现的一种更加完善的DNA

体外扩增和检测技术。在检测点突变等方面具有独特的优点。

(一) LCR的原理 该技术是利用DNA连接酶构建共价磷酸键，特异地连接双链DNA，经加

热变性、退火和连接等步骤后，再多次反复循环，从而使目的DNA得以大量扩增。

(二) LCR的主要用途 主要用途有以下三个方面。

1. 单碱基突变遗传病的检测 该技术在识别点突变方面优于PCR，该技术首先用于单碱

基突变遗传病的诊断；据报道已用LCR识别了镰状细胞贫血患者珠蛋白基因发生的A→T替换。 2. 病原微生物的检测可用于李氏杆菌、结核杆菌、淋球菌及沙眼衣原体等病原微生物种

及亚种的鉴别。

3. 定向诱变LCR法能连接PCR扩增片段，进行多位点同时定向诱变，或随机设计，因而

是一种有效的基因改建和构造方法。

总之，LCR设计独特，在某些方面特别是检测点突变方面是有优势的，目前尚不能为其

他手段取代，它作为一种DNA扩增和检测技术，具有很大的发展前景。