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质粒图谱分析法&染色质DNA酶切图谱分析法

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发表时间:2019-08-07 15:32作者:武汉新启迪Xinqidi来源:http://www.qidibio.com

质粒图谱分析法&染色质DNA酶切图谱分析法


质粒图谱分析法

质粒在细菌中普遍存在,它位于细胞质中,系染色体外的遗传物质,由双螺旋环状DNA分子组成,可以忠实地自我复制,携带的外源基因可以赋予宿主细菌以新的表型,质粒在细菌间可以转移,并分布到子代细菌细胞中。因为来自同一祖先菌株的子代细菌,都含有同一数目,同一分子量的质粒,所以通过对质粒图谱的检测,可以鉴定被测细菌的种类。即将提取的质粒在琼脂糖凝胶上电泳后,根据其分子量的大小,分别排列开来,便呈现出有价值的特殊图型,即所谓的质粒图谱(plasmid profiles)。

但是具有相同分子量的质粒,可能具有极不相同的核苷酸排列序列,依此,可应用限制性内切酶进行酶切实验,以进一步证实分子量相似的质粒是否为同一质粒。即将被酶酶切的质粒片段进行电泳,根据酶切片段分子量的大小,便可在琼脂糖凝胶电泳板上排列成特殊的酶切图型,通过对图型的分析,就可确切地对被测细菌作出鉴定。


染色质DNA酶切图谱分析法

细菌核质是由一条环形的染色体组成,不含蛋白质或组蛋白,其本质是一条裸露的双股DNA,其上的基因与真核细胞不同,是连续的,无内含子,转录后形成的mRNA,不必再剪切、拼接,便可直接译成多肽。

细菌染色质DNA与质粒DNA一样,亦可用限制性内切酶消化,得到的DNA片段,用琼脂糖凝胶电泳进行分离,每个基因组形成的电泳图谱也是特异的,此即所谓的REA(restriction endonuclease analysis,限制性核酸内切酶分析)图谱技术,但获得的图谱随使用的内切酶种类不同,可以得到不同的电泳图谱,为便于肉眼观察,可应用出现片段大,图谱条带少的酶进行酶切为好,然后再用标记的基因探针做检测。

REA图谱技术可用以鉴别细菌种,甚至同种细菌不同的株,如果一个属或一个种内的所有成员都有相同的REA图谱,它就不能对细菌做鉴定了。


文章分类: 试剂盒技术资料
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