重组蛋白表达技术可用于多种下游应用,包括基因调控分析、蛋白结构及功能分析、蛋白质间相互作用分析等。对于特定的应用,使用正确的蛋白表达系统是实验成功的重要因素。在选择蛋白表达系统时,所需考虑的最重要因素是功能性、可溶性、速度及得率等。新启迪生物依托深厚的医学院资源背景、经验丰富的科研人员和专业的蛋白表达、纯化技术,可提供基于原核、酵母、昆虫杆状病毒、哺乳动物细胞等多种蛋白表达系统的微克至毫克级,高纯度蛋白定制服务。
四种蛋白表达系统的优缺点:
蛋白表达系统 | 优点 | 缺点 |
原核表达系统 | 时间短 | 无翻译后修饰 |
比较便宜 | 一些蛋白不能很好的折叠 | |
放大过程简单 | 蛋白分泌量少 | |
很好的表征遗传学 | ||
酵母表达系统 | 适度快速表达 | 需要使用酵母分泌信号肽 |
很好表达胞内蛋白和分泌蛋白 | 安全性还需提高 | |
比较便宜 | 具有与典型的哺乳动物蛋白不同的N-联聚糖结构 | |
大部分蛋白都能进行折叠和翻译后修饰 | ||
昆虫杆状病毒表达系统 | 适度快速表达 | 成本比较高 |
很好表达胞内蛋白、膜蛋白和分泌蛋白 | 难以放大 | |
大部分蛋白都能进行折叠和翻译后修饰 | 具有与典型的哺乳动物蛋白不同的N-联聚糖结构 | |
哺乳动物细胞表达系统 | 适度快速表达 | 成本比较高 |
很好表达膜蛋白和分泌蛋白 | 胞内蛋白产量低 | |
所有蛋白都能进行折叠和最真实的翻译后修饰 | ||
哺乳动物细胞表达系统 | 很好表达膜蛋白和分泌蛋白 | 成本比较高 |
所有蛋白都能进行折叠和最真实的翻译后修饰 | 周期长 | |
大肠杆菌蛋白表达系统是最常用也是最经济实惠的蛋白表达系统。大肠杆菌蛋白表达系统主要有以下特点:遗传背景清楚;易于培养和控制;转化操作简单;表达水平高;成本低;周期短。
新启迪技术团队有丰富的大肠杆菌系统蛋白表达经验。针对于有些外源基因在大肠杆菌中重组表达会形成膜包裹的高密度、不溶性蛋白质的包涵体的情况,我们会进行表达系统优化,尽量降低形成包涵体的几率。同时我们会通过评估确定最佳的复性条件,进行温和的包涵体変复性。我们提供的复性蛋白纯度在95%以上。
我们可以提供带有不同标签的特色融合蛋白的表达,对于客户要求切除标签的情况,我们可以做到切标签不留残基。我们具有特色的低温诱导表达体系,大大提高了蛋白可溶表达几率,增加了表达成功率和蛋白产物的活性概率。
项目成功率超过95%。
专业的蛋白表达技术团队
一站式技术服务
密码子优化:综合考虑到基因合成、载体构建、基因转录、mRNA翻译及修饰过程中的20多种因素。
大规模制备和发酵:我们拥有10L、100L的发酵设施,可在短时间内交付客户大量高纯度的目的蛋白。
密码子优化
涉及基因合成、载体构建、基因保证转录、mRNA翻译、翻译后修饰等环节。
载体构建和目的基因亚克隆,新启迪有多种原核表达载体如pET-24(+),pETBlue, pGEX-6P-1和多种大肠杆菌表达宿主如BL21, Origami DE3等供挑选。
表达菌株的筛选及蛋白的小量诱导检测。
优化蛋白的表达方案并大量表达和纯化蛋白。
拥有先进的纯化系统和全套预装的离子柱、分子筛、疏水柱及亲和层析柱。
蛋白折叠、修饰、复性以及内毒素检测和去除。
新启迪提供多种蛋白的翻译后修饰和检测和蛋白质复性服务。
蛋白鉴定。
利用定性或者定量分析的方法进行蛋白质鉴定。
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