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武汉新启迪生物科技有限公司

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重组蛋白定制服务

重组蛋白表达技术可用于多种下游应用,包括基因调控分析、蛋白结构及功能分析、蛋白质间相互作用分析等。对于特定的应用,使用正确的蛋白表达系统是实验成功的重要因素。在选择蛋白表达系统时,所需考虑的最重要因素是功能性、可溶性、速度及得率等。新启迪生物依托深厚的医学院资源背景、经验丰富的科研人员和专业的蛋白表达、纯化技术,可提供基于原核、酵母、昆虫杆状病毒、哺乳动物细胞等多种蛋白表达系统的微克至毫克级高纯度蛋白定制服务。

四种蛋白表达系统的优缺点:

蛋白表达系统

优点

缺点

原核表达系统

时间短

无翻译后修饰

比较便宜         

一些蛋白不能很好的折叠

放大过程简单

蛋白分泌量少

很好的表征遗传学


酵母表达系统

适度快速表达

需要使用酵母分泌信号肽

很好表达胞内蛋白和分泌蛋白

安全性还需提高

比较便宜

具有与典型的哺乳动物蛋白不同的N-联聚糖结构

大部分蛋白都能进行折叠和翻译后修饰


昆虫杆状病毒表达系统

适度快速表达

成本比较高

很好表达胞内蛋白、膜蛋白和分泌蛋白

难以放大

大部分蛋白都能进行折叠和翻译后修饰

具有与典型的哺乳动物蛋白不同的N-联聚糖结构

哺乳动物细胞表达系统
(瞬时表达)

适度快速表达

成本比较高

很好表达膜蛋白和分泌蛋白

胞内蛋白产量低

所有蛋白都能进行折叠和最真实的翻译后修饰


哺乳动物细胞表达系统
(稳定表达)

很好表达膜蛋白和分泌蛋白

成本比较高

所有蛋白都能进行折叠和最真实的翻译后修饰

周期长



大肠杆菌表达系统

背景介绍

大肠杆菌蛋白表达系统是最常用也是最经济实惠的蛋白表达系统。大肠杆菌蛋白表达系统主要有以下特点:遗传背景清楚;易于培养和控制;转化操作简单;表达水平高;成本低;周期短。

新启迪技术团队有丰富的大肠杆菌系统蛋白表达经验。针对于有些外源基因在大肠杆菌中重组表达会形成膜包裹的高密度、不溶性蛋白质的包涵体的情况,我们会进行表达系统优化,尽量降低形成包涵体的几率。同时我们会通过评估确定最佳的复性条件,进行温和的包涵体変复性。我们提供的复性蛋白纯度在95%以上。

我们可以提供带有不同标签的特色融合蛋白的表达,对于客户要求切除标签的情况,我们可以做到切标签不留残基。我们具有特色的低温诱导表达体系,大大提高了蛋白可溶表达几率,增加了表达成功率和蛋白产物的活性概率。

服务优势

项目成功率超过95%。
专业的蛋白表达技术团队
一站式技术服务
密码子优化:综合考虑到基因合成、载体构建、基因转录、mRNA翻译及修饰过程中的20多种因素。
大规模制备和发酵:我们拥有10L、100L的发酵设施,可在短时间内交付客户大量高纯度的目的蛋白。

服务基本流程

密码子优化
涉及基因合成、载体构建、基因保证转录、mRNA翻译、翻译后修饰等环节。


载体构建和目的基因亚克隆,新启迪有多种原核表达载体如pET-24(+),pETBlue,   pGEX-6P-1和多种大肠杆菌表达宿主如BL21, Origami DE3等供挑选。


表达菌株的筛选及蛋白的小量诱导检测。


优化蛋白的表达方案并大量表达和纯化蛋白。
拥有先进的纯化系统和全套预装的离子柱、分子筛、疏水柱及亲和层析柱。


蛋白折叠、修饰、复性以及内毒素检测和去除。
新启迪提供多种蛋白的翻译后修饰和检测和蛋白质复性服务。


蛋白鉴定。
利用定性或者定量分析的方法进行蛋白质鉴定。

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